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臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試微生物學(xué)知識(shí)點(diǎn)精講
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第八節(jié) 細(xì)菌感染的檢查方法與防治原則
大綱要求:
1. 細(xì)菌學(xué)診斷:(1)標(biāo)本的采集原則;(2)檢驗(yàn)程序
2. 血清學(xué)診斷: 常用的血清學(xué)診斷方法。
3. 人工主動(dòng)免疫與被動(dòng)免疫:(1)特異性免疫的獲得方式 (2)人工免疫的概念和常用的免疫制劑。
一 細(xì)菌學(xué)診斷
1. 標(biāo)本的采集原則:重點(diǎn)
(1) 早期采集細(xì)菌標(biāo)本,未應(yīng)用抗生素前進(jìn)行。
(2) 嚴(yán)格無(wú)菌操作,防止被其他微生物污染。
(3) 根據(jù)病種確定標(biāo)本類(lèi)型和采集部位。
(4) 做好標(biāo)記,盡快送檢。一般情況下冷藏送檢,但奈瑟氏菌需室溫送檢
2. 檢驗(yàn)程序,常用的五類(lèi)病原學(xué)診斷方法
(1) 鏡下檢查:初步涂片染色,觀察細(xì)菌結(jié)構(gòu)
(2) 分離、培養(yǎng)、鑒定:進(jìn)行生化反應(yīng)鑒定
(3) 抗原檢測(cè):紅細(xì)胞凝集、放免(ria)、酶免疫(eia)和免疫熒光
(4) 分子生物學(xué):核酸雜交、pcr及基因芯片檢測(cè)核酸
(5) 免疫學(xué)試驗(yàn):檢測(cè)宿主的抗體和細(xì)胞免疫指征
上述方法需要結(jié)合流行病學(xué)和臨床體格檢查綜合作出判斷
在適當(dāng)?shù)那闆r下,根據(jù)標(biāo)本類(lèi)型作出合理判斷,選擇性應(yīng)用上述方法進(jìn)行檢查,提高檢出率。
例題:標(biāo)本采集原則不包括
a.未應(yīng)用抗生素前進(jìn)行b.嚴(yán)格無(wú)菌操作c.均需要低溫送檢d.根據(jù)病種確定標(biāo)本類(lèi)型和采集部位e.盡快送檢
答案 c 解析 奈瑟氏菌需要常溫下送檢。
二 血清學(xué)診斷:用已知細(xì)菌或細(xì)菌抗原檢測(cè)體液中有無(wú)相應(yīng)抗體及抗體效價(jià)。
1. 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(elisa)、放射免疫試驗(yàn)(ria)及免疫熒光試驗(yàn):運(yùn)用不同標(biāo)記檢測(cè)血清中的特異性抗體或特異性抗原。
2. 蛋白印記實(shí)驗(yàn) (western blot):sds-page電泳分離混合蛋白條帶,而后用特異抗體與之雜交,再加入酶或同位素標(biāo)記的二抗,然后曝光顯示蛋白條帶,可用于驗(yàn)證elisa的正確與否,在aids中檢測(cè)最常用。
3. 中和試驗(yàn)(nt):先在血清中加入特異抗原或抗體發(fā)生中和,再檢測(cè)血清中的目的抗體或抗原,如果是陰性,則中和試驗(yàn)陽(yáng)性。如抗鏈o試驗(yàn),用于風(fēng)濕熱
4. 試管凝集試驗(yàn):抗體效價(jià)的檢測(cè)。抗體效價(jià)高或恢復(fù)期血清抗體大于等于急性期的4倍,支持該病原體感染,如肥達(dá)氏反應(yīng)用于傷寒副傷寒感染檢測(cè)。
三 人工主動(dòng)免疫與人工被動(dòng)免疫
1. 對(duì)某種感染性疾病的特異性免疫可有病后天然免疫和人工免疫獲得。
2. 人工主動(dòng)免疫:用人工接種的方法給機(jī)體注射抗原性物質(zhì),使機(jī)體免疫系統(tǒng)因受抗原刺激而產(chǎn)生體液和細(xì)胞免疫應(yīng)答的過(guò)程。接種后1-4周產(chǎn)生免疫應(yīng)答,用于疾病預(yù)防。免疫制劑包括:減毒活疫苗、滅活疫苗、類(lèi)毒素、亞單位疫苗和基因工程、dna疫苗。
3. 人工被動(dòng)免疫:將含有特異性抗體的免疫血清或免疫細(xì)胞因子等制劑,直接注入機(jī)體,使之立即獲得免疫力的過(guò)程。免疫制劑包括:抗毒素、丙種球蛋白、細(xì)胞免疫制劑等。
4. 常見(jiàn)免疫制劑
(1) 減毒活菌(疫)苗:如卡介苗、鼠疫減毒活疫苗、布魯氏菌活疫苗、炭疽活菌。
(2) 滅活菌(疫)苗:百日咳滅活菌苗、傷寒滅活疫苗、霍亂滅活疫苗
(3) 類(lèi)毒素:外毒素經(jīng)0.3-0.4%甲醛處理,毒性消失,但抗原性保留,如白喉類(lèi)毒素、破傷風(fēng)類(lèi)毒素,與滅活菌苗混合接種,有免疫佐劑效果
(4) 亞單位疫苗:用化學(xué)法提取病原菌中有效的免疫原成分支持,如腦膜炎球菌多糖疫苗和肺炎鏈球菌莢膜多糖疫苗
(5) 基因重組疫苗或基因工程疫苗:用工程菌表達(dá)微生物特異抗原成分,純化制成疫苗,如乙肝重組疫苗
(6) dna疫苗,研究階段
(7) 抗毒素:破傷風(fēng)、白喉、肉毒抗毒素等
(8) 丙種球蛋白:人血丙種球蛋白,無(wú)特異性;特異性丙種球蛋白,人經(jīng)某種疫苗免疫后取其特異丙種球蛋白,用于預(yù)防和治療。
(9) 細(xì)胞免疫制劑,如細(xì)胞因子。
1-6為人工主動(dòng)免疫制劑,后3種為被動(dòng)免疫制劑。
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